應(yīng)用指南：腺相關(guān)病毒 (AAV) 的免離心澄清和收獲
作者:?Frederik Meierrieks 和? Andreas Pickl
本研究旨在評(píng)估 Sartoclear Dynamics? Lab 助濾劑（含硅藻土 (DE)）用于澄清 HEK293 懸浮細(xì)胞產(chǎn)生的腺相關(guān)病毒 (AAV) 粗制裂解物的適用性。實(shí)驗(yàn)證明，使用 Sartoclear Dynamics? Lab 助濾劑進(jìn)行過(guò)濾是澄清 AAV2、AAV5 和 AAV8 的可行方法。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn) AAV 生產(chǎn)工藝，濾液中的 AAV 顆粒的回收率可達(dá) >95%。即使難以處理的血清型（如 AAV2 和含有較低 AAV 顆粒滴度的裂解物）也可以通過(guò) Sartoclear Dynamics? Lab 過(guò)濾進(jìn)行澄清，病毒回收率 >80%。
概述
本研究概述了一種成功的優(yōu)化策略，該策略利用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) (DoE) 方法將 AAV2 的產(chǎn)量提高到了 95% 以上。此外，相較于先離心再過(guò)濾的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)方法，使用 Sartoclear Dynamics? Lab 助濾劑將手動(dòng)處理時(shí)間縮短了 2/3，并將過(guò)濾通量提高了 3.5 倍。
- 頁(yè)數(shù):?8
- 閱讀時(shí)長(zhǎng):?14 分鐘
- 最新更新日期:?2023年5月
關(guān)鍵要點(diǎn)：
- 為什么 Sartoclear Dynamics? Lab 過(guò)濾是澄清 AAV 粗細(xì)胞裂解物的可行方法。
- Sartoclear Dynamics? Lab 對(duì)濁度降低效果、腺相關(guān)病毒 (AAV) 產(chǎn)量和過(guò)濾通量，以及手動(dòng)處理時(shí)間的影響。
- 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) (DoE) 研究中，硅藻土 (DE) 濃度和 DE 孵育時(shí)間對(duì) AAV2 保留和濁度降低效果的影響。
該資源適用于以下用戶(hù)：
- 實(shí)驗(yàn)室研究人員
支持的應(yīng)用：
- 生命科學(xué)研究
- 澄清
- 病毒載體
- 基因療法
- 硅藻土 (DE)
- 腺相關(guān)病毒 (AAV)